方法名称,电子烟烟油中尼古丁、1,2-丙二醇、丙三醇含量测定《HXX/CS-SOP/B-2018-001》
2.3.3.1工作曲线a………………..………………………………………9
2.3.3.2工作曲线b………………..………………………………………9
附件4内部1,2-丙二醇、丙三醇检测标准品选择对比实验………………………27
目前,国内外尚未有正式用于检测电子烟油中的尼古丁、1,2-丙二醇和丙三醇含量的相关标准。但与其最相关的参考标准主要有以下几个,
1、中国电子商会电子烟行业委员会在2017年12月20日发布并于2018年1月10日正式实施的中国电子商会团体标准T/CECC1-2017《电子烟雾化类器具产品通用规范》和T/CECC2-2017《电子烟雾化液规范》,其中T/CECC2-2017
《电子烟雾化液规范》中指出电子烟雾化液中1,2-丙二醇和丙三醇含量按YC/T242-2008《烟用香精乙醇、12-丙二醇、丙三醇含量测定气相色谱法》检测标准采用GC-FID法测定。
YC/T242-2008采用气相色谱仪联用氢火焰离子化检测器,以30mx0.25mmi.d.,膜厚1μm,固定相为35%联苯-65%聚二甲基硅氧烷作为分离柱(1)4-丁二醇做为内标,正丙醇做为萃取剂,氦气作为载气,测定稀释后样品中乙醇、1,2-丙二醇和丙三醇含量。但该检测方法主要适用于烟用香精中的乙醇、1,2-丙二醇和丙三醇含量测定,不涉及尼古丁含量测定,而电子烟烟油是否属于烟用香精类别,尚未明确,且此方法发布时间年久,对于新生的电子烟烟液物质检测有局限性,如线性范围不适合测定高含量的丙三醇等。
2、法国标准化协会(AFNOR)于2015年和2016年出版了电子烟和烟油
XPD90-300-2:2015GC-FID法采用异丙醇为萃取剂、正十七烷做为内标物,采用气相色谱仪联用氢火焰离子化检测器,以ZBWAX(3mx0.18mmi.d,膜厚18μm,从长20m的ZBWax毛细柱截取获得)作为分离柱,氦气作为载气,分析
尼古丁、1,2-丙二醇和丙三醇,薄荷醇目标物含量。该检测方法是以附件形式出现在法国电子烟标准中,为标准方法节选部分。
3、其他如,国内国家检测标准GB/T23355-2009《卷烟总粒相物中烟碱的测定气相色谱法》、国内烟草行业检测标准YC/T154-2001《卷烟滤嘴中烟碱的测定气相色谱法》、YC/T156-2001《卷烟总粒相物中烟碱的测定气相色谱法》、YC/T185-2004《卷烟侧流烟气中焦油和烟碱的测定》均含有采用气相色谱仪联用氢火焰离子化检测器,GC-FID,法测定烟碱成分,但属于传统卷烟检测标准,
国际烟草研究合作中心(CORESTA)于2017年发布了电子烟气溶胶中烟碱、1,2-丙二醇和丙三醇测试推荐方法《CORESTARECOMMENDEDMETHODN°84》。采用气相色谱仪联用氢火焰离子化检测器,GC-FID,法测定电子烟气溶胶中烟碱、1,2-丙二醇和丙三醇,但其目标定向于电子烟雾化产生的气溶胶中的烟碱、1,2-丙二醇和丙三醇含量测定,与我们的检测目标主体是市售的电子烟烟油中烟碱、1,2-丙二醇和丙三醇含量,在结果表述上有很大的差别。
综上所述,本分析测试中心借鉴和参考上述国内外有关的检测标准,主要参考上述的1、 2条,制定实验室内部的非标准检测方法,采用气相色谱仪联用氢火焰离子化检测器,GC-FID, ,无水乙醇为萃取剂,喹啉做为内标物测定烟油中尼古丁含量、外标法测定1,2-丙二醇和丙三醇含量,其中,选用无水乙醇做为萃取剂,安全环保,选用的喹啉是国内外相关参考文献中的一种,且两个方法合二为一,操作简单准确可靠,极大减少了工作量,该方法通过方法学验证,满足本中心的检测需求,可适用于检测电子烟油中的尼古丁、 1,2-丙二醇和丙三醇含量。检测方法详细内容请参阅附件3, HXX/CS-SOP/B-2018-001 《电子烟烟油中尼古丁、 1,2-丙二醇、丙三醇含量测定》 ,其中1,2-丙二醇简称PG,丙三醇简称VG,下文的PG、VG分别代表1,2-丙二醇、丙三醇。
参考GB/T 27417-2017《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中实验室对化学分析方法进行方法确认和方法验证一般性原则,结合本实验室的实际运行情况,对本实验室内部制定的方法进行方法确认。
主要进行的方法确认的特性参数内容如下,a方法的选择性,c线性范围,b检出限和定量限,
d精密度,重复性和再现性, ,e正确度,f准确度,g称样量考量,h溶液稳定性,
1.1岛津气相色谱仪(GC-2010plus,带氢火焰离子化检测器, 内部编号
1.91,2-丙二醇标准品,纯度99.6%,湖南省药用辅料工程技术研究中心,1.10丙三醇标准品,纯度99.5%,湖南省药用辅料工程技术研究中心。
由于电子烟烟油主要成分由1,2-丙二醇、丙三醇、乙醇、尼古丁及香精香料组成,其中1,2-丙二醇、丙三醇占绝对比例,≥90%, ,则主要考察1,2-丙二醇、丙三醇、乙醇、尼古丁及喹啉内标物内在联系,分别取乙醇空白液和1,2-丙二醇、尼古丁、喹啉内标物质及丙三醇各单标准品的乙醇溶液, 同等浓度的1,2-丙二醇、尼古丁、喹啉内标物质及丙三醇标准品的乙醇混合液,进行进样测试,考察各待测检测物、 内标物质的分离情况。
其中,在SHIMADZU-SH-Rtx-Wax, 30 m×0.25 mm ID,0.25μm色谱柱及方法规定的色谱条件下,乙醇空白液在保留时间为2.0min处出现乙醇峰( 1)2-丙二醇、尼古丁、喹啉内标物质及丙三醇各单标准品的除乙醇峰外,分别在
其各峰与空白液、各物质单标准质出峰时间一致,其面积与各物质单标准质出峰面积基本一致,其典型色谱图见附件一。
结果表明,采用方法中的色谱柱及色谱条件能有效分离被测化合物, 出峰时间,峰型,峰与峰分离度能满足定性和定量分析。
样品中可能存在的干拢物质主要来源于添加的香精香料提取物中的不明化合物, 由于香精香料提取物种类繁多、成分复杂,分析所有香精香料显然不具备可行性,故选取常用于调制电子烟油口味、 口感的常见香精香料进行分析, 以查看可能干扰1,2-丙二醇、丙三醇、尼古丁、 内标喹啉的物质。
取60组常用于调制电子烟油口味、 口感的香精香料,采用最大化法,称取与检测烟油一致的称样量,分析香精香料中的的可能存在的干拢峰,则称取0.2 g香精香料至10mL容量瓶中,用无水乙醇溶解后,进行色谱分析。
结果在选取60组香精香料中大部分香精香料含有丙二醇、丙三醇,少部分含有尼古丁,已用GC-MS定性,确定是丙二醇、丙三醇、尼古丁物质,非其他干扰物, ,其不影响最终电子烟液中的丙二醇、丙三醇,尼古丁总量的测定,除上述峰外,还存有在各个保留时间点的峰,其峰位置、数目、大小因香精香料种类而异,在60组测试样品中,大部分香精香料的色谱峰不干扰丙二醇、丙三醇、尼古丁和喹啉内标峰,仅有3组香精的峰与喹啉内标峰发生重叠, 比例仅为5%,影响到用喹啉作内标对尼古丁的测定。 由于香精香料在电子烟液的添加配比一般为5-35%,最常见添加配比为5-20%,而在烟用香精香料中其溶剂,丙二醇、丙三醇等,又占主要成分,而上述香精香料测试浓度远大于电子烟液中香精香料的浓度,10倍以上, , 因此,存在共流峰的几率很小,其共流峰对喹啉内标峰的贡献也很少、对尼古丁测定影响可忽略不计。对于可能对结果产生较大影响的,可以软件积分扣除,也可以通过改用正十七烷做为内标校正。
黑樱桃越莓栗荟加仑香香瓜瓜瓜 乌梅萝参檬克力蜜桃啡草绝无草子 红茶荷脑烟4子香烟55烟6宝路驼草薄荷
精密称取喹啉标准品(纯度96%)0.2611 g,至250mL容量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为喹啉内标液,其中喹啉浓度为1.0026 mg/mL。
准确移取0.05、 3.00、4.00、5.00、8.00、9.00mL标准混合溶液至10mL 容量瓶,加入1.0mL上述喹啉内标液,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,依次从低浓度到高浓度进行色谱进样,计算各级标准溶液中尼古丁与喹啉内标的浓度比、峰面积比,做出尼古丁与内标浓度比与峰面积比的拟合曲线-丙二醇、丙三醇浓度与峰面积的的拟合曲线,考察在其系列浓度值下的线线性范围
根据上述标准浓度值范围,分别以0.1g和0.2g称样量换算,可得到检测样品中的目标物浓度范围如下,
中国电子商会电子烟行业委员于2017年12月20日发布了中国首个电子烟团体标准T/CECC 2-2017 《电子烟雾化液规范》做出了限度要求,及欧盟TPD 法规规定,市场上流通的电子烟烟液中尼古丁浓度不超过20mg/mL。
目前, 国内市场上电子烟尼古丁浓度主要集中在24mg/mL以下,最常见的产品规格烟碱,尼古丁,标示浓度有3mg/mL, 6mg/mL, 9mg/mL, 11 mg/mL,12mg/mL, 16mg/mL, 18mg/mL和24mg/mL ,电子烟油密度1.037~1.288, 。而在电子烟烟液中1,2-丙二醇、丙三醇成份占电子烟液的主要部分,两者和一般不少于电子烟烟液总质量的90%,其中的丙三醇,俗称蔬菜甘油,是电子烟烟液是产生雾化效果的主要成份,为了达到与传统卷烟一样的烟雾效果,其含量一般不少于电子烟烟液总含量的30%,而最常见的电子烟液中的1,2-丙二醇,丙三醇质量配比为70:30、 60:40、 50:50、 40:60、 30:70、 0:100。
结合上述,为了使样品在合理称样量下目标物质响应值均在各自曲线范围内,且只需称量一次,本分析测试中心在测定电子烟烟油中尼古丁、 1,2-丙二醇、丙三醇含量时,选取的尼古丁线-丙二醇线深圳瀚星翔科技有限公司分析测试中心 方法验证报告
喹啉内标溶液,称取喹啉标准品(纯度96%)0.2615 g,至250mL容量瓶中,加无水乙醇溶解并 稀释至刻度,摇匀,作为喹啉溶液, 其中喹啉浓度为
分别精密量取1.0 mL上述喹啉内标液至6个不同的10 mL容量瓶中,再精密量取0.5、 1.0、 2.0、 3.0、 5.0、 8.0 mL标准储备液至上述6个10mL容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,从低到高浓度依次进样,做出尼古丁与内标浓度比与峰面积比的拟合曲线-丙二醇、丙三醇浓度与峰面积的的拟合曲线、相关系数,结果如下表所示,
喹啉内标液,称取喹啉标准品(纯度96%)0.2605 g,至250mL容量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为喹啉溶液, 其中喹啉浓度为
分别精密量取1.0 mL上述喹啉内标液B至6个不同的10 mL容量瓶中,再精密量取0.5、 1.0、 2.0、 3.0、 5.0、 8.0 mL标准储备液至上述6个10mL容量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,从低到高浓度依次进样,做出尼古丁与内标浓度比与峰面积比的拟合曲线-丙二醇、丙三醇浓度与峰面积的的拟合曲线、相关系数,结果如下表所示,